羅格于（Ben Wright 配音）和阿尼塔（Lisa Davis 配音）夫婦飼養的大麥町狗龐哥（Rod Taylor 配音）與帕蒂塔（Cate Bauer 配音）喜結良緣，共組成歡樂家庭。沒過多久，帕蒂塔生育了十五只小狗。正在一家人享受小狗帶來的歡樂之際，阿尼塔的女下屬克魯拉·德維爾（Betty Lou Gerson 配音）打起了壞主張。她正在為制作一件黑白斑點的大衣而發愁，因而她派人綁走了小狗，和其他八十四只大麥町幼犬一同關在鄉下的空屋里。發現孩子失蹤的龐哥與帕蒂塔，通過狗吠召集全市的狗類，一同找尋自己的孩子，一場小狗救援記就此展開，龐哥與帕蒂塔能否在小狗被宰殺之前營救他們逃出呢……《101斑點狗》是迪士尼1961年推出的第17部經典動畫，取材自Dodie Smith 的作品。