1991年，曾小敏考入廣東粵劇學校。1994年，獲廣東省首屆粵劇演藝大賽銅獎 。1995年，獲中國中等專業藝術學校“梨園杯”一等獎第一名 。1996年，曾小敏參加全國戲校梨園杯大賽。1997年，曾小敏被分配到廣東粵劇院工作 。
2003年，曾小敏參加中國戲曲演唱大賽。2004年1月1日，曾小敏表演昆曲改編曲目《尋夢》 。2005年，廣東粵劇院成立青年團，曾小敏當選副團長。2006年，曾小敏主演粵劇新編劇目《大明悲歌》《越國孤雁》。
2009年，曾小敏當選廣東粵劇院院長助理 。2011年11月，曾小敏主演現代粵劇劇目《青春作伴》 。2014年，曾小敏當選廣東省政協第十一屆委員、廣東粵劇院副院長。同年，曾小敏表演粵劇劇目《白蛇傳·情》 。
2015年2月10日，曾小敏舉辦“穿越時尚——曾小敏粵劇經典演唱會” 。8月6日，其主演的粵劇電影《傳奇狀元倫文敘》在廣州公映 。
2017年5月22日，曾小敏獲第28屆中國戲劇梅花獎 。2018年1月，任第十三屆全國人民代表大會代表 。1月16日，曾小敏領銜主演的神話粵劇電影《柳毅奇緣》首映 。10月1日，參加《2018國慶戲曲演唱會》，演唱粵曲《南國風采》 。
2019年2月4日，曾小敏參加《2019年中央廣播電視總臺春節聯歡晚會》，參與戲曲《錦繡梨園》表演 。3月10日，參加央視戲曲節目《角兒來了》 。6月，獲第十六屆文華表演獎 。9月12日上午，被聘任為廣東粵劇院院長 。10月2日，參加央視戲曲節目《一鳴驚人》，表演尾聲《此生最愛是梨園》 。12月7日，參加中國青年電視公開課節目《開講啦》，為觀眾帶來她和粵劇之間的故事，以及她對于傳統文化傳承與創新的思考 。
2020年4月10日，曾小敏被確認為廣東省第六批省級非物質文化遺產代表性項目（粵劇）代表性傳承人 。9月27日，參加網易云音樂與新華社“聲在中國”聯合推出的非遺音樂紀錄微綜藝《不曾遺忘的符號》播出第三期《好耐冇見啦》，與Tizzy T謝銳韜創作并演繹了說唱版《帝女花》 。
2021年2月11日，曾小敏參加《2021年中央廣播電視總臺春節聯歡晚會》，參與戲曲《盛世百花園》表演 。2月12日，參加《2021年中央廣播電視總臺春節戲曲晚會》，與湯非、張馨月、蕭雅、王二妮、馮詠梅合作序曲《唱響新時代》 。2月16日，參加央視戲曲節目《一鳴驚人》，演唱粵語歌《攬水見月圓》 。2月26日，參加《2021元宵戲曲晚會》，與丁凡合作粵劇劇目《寶蓮燈》 。3月，開啟曾小敏粵劇藝術全國巡演，從大灣區出發 。5月20日，領銜主演的粵劇電影《白蛇傳·情》上映，在劇中扮演白素貞 。12月6日，參加央視戲曲節目《一鳴驚人》，為觀眾開啟一堂別開生面的“梨園公開課” 。12月31日，參加《2021最美的夜 bilibili晚會》，與梁漢文出演節目《白蛇傳·情》主題秀 。
2022年1月1日，曾小敏參加《揚帆遠航大灣區——2022新年音樂會》，與董寶石、崔子格表演開場曲《大灣區協奏曲》 。2022年2月1日，曾小敏參加廣東衛視的《2022龍騰虎躍大灣區廣東衛視春節晚會》，與張衛健等表演粵劇交響樂《俠骨柔情》 。2月，參加中國文學藝術界2022春節大聯歡《百花迎春》晚會，表演廣東粵劇《白蛇傳·情》 。